TAE=Tris base + acetic acid + EDTA

TBE=Tris base + boric acid + EDTA

TBE/TAE buffers are often used in镀镍 procedures involving D/RNAs.

Tris-acid solutionsare effective buffers to keep DNA deprotonated and s镀镍oluble in water.EDTAis a chelator of divalent cations, whichprotects the nucleic acids against enzym镀镍atic degradation。

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BioEngX翻译时间：我们在进行DNA电泳时都会加入缓冲溶液，常用的缓冲溶液有TAE（ 三羟基氨基甲烷+乙酸+EDTA），或者TBE（三羟基氨基甲镀镍烷+硼酸+EDTA ）。想知道EDTA中文名字的看这里：乙二胺四乙酸。

缓冲液的作用是什么

缓冲液的作用之一是维持溶液的pH稳定。 电流通过水(H2O)时，在阳极发生氧化反应，生成氧气以及氢离子；在阴极发镀镍生还原反应，生成氢气以及氢氧根离子。长时间电泳将会使阳极变酸，阴极变碱。一个好的缓冲系统应该有较强的缓冲能力，使溶液两极的pH保持基本稳定。

电泳缓冲液的另一个作用是使溶液带有一定的导电性，以利于DNA镀镍分子的迁移。 DNA为碱性物质，在电泳（缓冲液pH=8）时带负电荷，由负极向正极迁移。

电泳缓冲液还有一个组分是EDTA，目的是螯合Mg2+等离子，防止电泳时激活DNA酶。由于核酸酶需要这些离子，EDT镀镍A可以将这些离子牢牢抓住，避免核酸降解。但要注意的是，镁离子同时是很多酵素的辅助因子，如限制酶、DNA聚合酶等等，因此EDTA的浓度一般不会太高（通常在1mM左右）。

TAE和TBE哪个更好

DNA电泳时镀镍应该用哪个？这其实取决于你的实验目的。下面我们来看看二者的区别[1]

TBE的电导率大于TAE的电导率。因此相比于TAE，TBE不太会导致电泳槽内过热的情况发生，长时间电泳推荐使用TBE。

硼酸是酶的抑制镀镍剂，因此如果你需要分离电泳的DNA用于酶切反应，建议使用TAE作为电泳缓冲溶液。

TBE对于较小片段的分离效果更好。对于小于300bp的片段，在2%的琼脂糖凝胶上，TBE中的迁移速度更快。

TAE适用于大镀镍片段的分离，大于2kb的片段在TAE中的迁移速度更快（0.8%的琼脂糖凝胶中），速度比在TBE中快出约10%

TAE更适用于回收DNA片段。

相比于TBE，TAE对于超螺旋的DNA分辨率更高[2]

TAE和镀镍TBE的配制方法

在本文的0后，我们列出TAE与TBE的配方以及配配制方法，供大家查询使用[3]。

TAE缓冲液

实验之中经常将TAE配制成10× 或者 50× 的储液，实验前稀释储液到1×的工作液。 

1x 镀镍TAE 缓冲液的成分是：

40 mM Tris (pH 7.6)

20 mM acetic acid

1 mM EDTA

50x TAE储液配制方法：

将Tris(FW=121) 242g，100 ml 0.5镀镍 M EDTA， 57.1 ml的冰醋酸溶解在600 ml的去离子水中；而后调节pH至8.3，加去离子水定容至1L后，室温保存。使用时稀释50倍 即为1×TAE Buffer。

TBE缓冲液

TBE缓冲液镀镍可以配置成 5× 或者 10×的储液。

1x TBE 缓冲液的成分是：

89 mM Tris (pH 7.6)

89 mM boric acid

2 mM EDTA

10x TBE 储液配制方法：

将Tris（F镀镍W=121）108g，硼酸（FW=61.8）55g，40 ml 0.5 M EDTA 溶解在600 ml的去离子水中；而后调节pH至8.3，加去离子水定容至1L后，室温保存。使用时稀释10倍 即为1×镀镍TBE Buffer。

参考文献

[1] 三浦裕, 和気弘明, 加藤泰治. TBE, or not TBE; that is the question: Beneficial usage of tris-b镀镍orate for obtaining a higher resolution of small DNA fragments by agarose gel electrophoresis[J]. Na镀镍goya medical journal, 1999, 43(1): 1-6.

[2] Dingman C W, Peacock A C. Analytical studies on nuclear ri镀镍bonucleic acid using polyacrylamide gel electrophoresis[J]. Biochemistry, 1968, 7(2): 659-668.

[3] htt镀镍p://www.bio-rad.com/webroot/web/pdf/lsr/literature/Bulletin_6205.pdf

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